안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 식품의약품안전평가원에서 제공하고 있는 치료용 DNA 백신의 품질 및 비임상시험 평가 가이드라인에 대해서 살펴보고자 합니다. 면역반응을 유도하거나 활성화하는 하나 이상의 DNA 서열을 함유하는 정제된 플라스미드를 대상으로, 이를 DNA 백신으로 정의합니다. 현재 DNA 백신은 DNA 백신 단독 사용에 한정하지 않고 바이러스 벡터나 단백질 항원으로 추가 면역하거나 싸이토카인이나 T세포의 다양한 항원 결정기를 암호화하는 플라스미드 DNA와 함께 주입하는 경우, 보조제를 사용하여 DNA가 세포 안으로 들어가게 하거나 면역 반응을 일으키게 하는 등 다양하게 개발되고 있습니다. 소개드린 가이드라인에서는 이려한 'DNA 백신'을 이용하여 임상시험 승인 신청 및 품목허가를 위한 품질 및 비임상 시험 제출자료를 준비할 때 필요한 세부 사항들을 제시하고 있습니다. 다음의 자료를 살펴보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번시간에는 Cytokine release syndrome에 대해 알아보겠습니다. 최근 개발되는 면역항암제는 immune check point inhibitor, chimeric antigen receptor (CAR) T cell등이 사용되고 있고, 임상에서도 큰 효과를 주고있어 많이 각광받고 있습니다. 하지만 강력한 면역 치료 효과로 인해 오히려 부작용으로 cytokine release syndrome이 생길 수 있습니다. Cytokine release syndrome은 면역을 과하게 증가시키는 약물 치료로 인해 T cell stimulation이 과다하게 일어나 cytokine storm이 일어나게 되며 나타나는 전신 염증작용입니다. Cytokine release syndrome의 부작용으로는 mild하게는 발열, 발진, 관절통, 근육통 등이 일어날 수 있지만, 심각한 경우 전신 장기의 기능 부전 및 사망까지도 이를 수 있습니다.  cytokine release syndrome에 대해 더 자세한 내용은 아래 문헌을 참고하시길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 CCR5-CCL5 axis가 NK세포가 tumor site로 homing하는데 중요하며, 이것을 vaccinia virus를 이용했을 때 항종양효과를 더욱 높일 수 있다는 내용을 담고 있는 논문을 소개해드리고자 합니다. 항암치료를 위해 사용되고 있는 NK세포는 종양 부위로 들어가기는 하지만, 말초혈액에 남아있기 때문에 고형종양을 가진 환자들에게 제한적으로 사용되고 있습니다. 이때 NK세포의 분포에 영향을 주는 케모카인 및 수용체들을 이용하여 NK세포의 치료 효능을 높일 수 있을 것이라는 가설에 대한 증명을 위해 lentivirus와 oncolytic virus를 이용하여 실험을 진행한 논문 입니다. 요약해서 말씀드리자면, CCL5가 재조합된 virus를 malignent cell에 in vitro로 주입했을때 복제효율 및 viability가 일반 virus와 비교했을때 비슷한 정도의 수준으로 유지됨을 확인하고, Tumor cell에서 CCR5발현 NK세포의 정도가 높으며  이것에 CCL5에 의한 것임을 확인했습니다. 또한 In vivo데이터 상에서도,  CCL5가 재조합된 바이러스를 주입했을 때 tumor growth를 늦추고 생존기간을 늘렸다고 합니다. 더 자세한 사항은 첨부파일을 참고해주시기 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까 비임상개발센터입니다. 이번 시간에는 Tumor necrosis factor-α 가 마우스 폐 조직의 tight junction에 미치는 영향에 대해서 알아보고자 합니다. TNF-α는 체내 발열원으로써, 열이 나게 유도하거나, 세포 자살을 유도하거나, IL-1과 IL-6의 생산을 통해 패혈증을 유발하거나, 악액질을 유도하거나, 감염을 유발하며 종양생성과 바이러스 복제를 억제하는 역할을 합니다. 본 연구에서 TNF-α을 억제하니, pleural exudate와 폐 조직에서의 TNF-α 생성과 inflmmatory cell infiltration이 감소되는 것을 확인할 수 있었습니다. 마찬가지로, immunohistochemistry 염색을 통해 세포의 tight junction에 관여하는 ZO-1, Claudin-2, Claudin-4, Claudin-5, β-catenin 의 발현 양상이 변화됨을 확인할 수 있었으며, apoptosis 비율에도 차이를 보였습니다. 이것으로 Tumor necrosis factor-α inhibition이 폐조직의 tight junction permeability를 감소시킨다는 점을 알 수 있었고, TNF-α가 폐포벽의 기능에도 영향을 준다는 것을 시사하고 있습니다. 논문을 읽어보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까, CND 관리자입니다.  이번 시간에는 oncolytic virus의 in vitro antitumoral effect에 대해 알아보겠습니다.  본 문헌에서 사용된 GLV-1h68은 미국과 유럽에서 임상 시험을 진행중인 바이러스 면역항암제입니다. 이 바이러스 치료제를 이용하여 다양한 종류의 cell line에서 단일 및 everolimus(mTOR inhibitor)를 병용 처리하여 항종양 효과를 확인했습니다.  자세한 내용은 하단의 문헌을 참고해주시기 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번 시간에는 나노물질에 대한 독성에 대해 포괄적으로 다루어보고자 합니다. 가공된 나노 입자는 특히 흡입을 통해 신체로의 진입이 이루어지며 나노 입자의 경로와 신체로의 진입 경로는 추가 연구가 필요한 실정입니다. 현재까지 추정되고 있는 메커니즘으로는 활성 산소 종 생성, protein misfolding, membrane pertubation 및 물리적 손상등이 있습니다. 나노 독성학에서 중요한 단계는 나노물질을 characterise하는 것인데 다양한 변수로 인해 일반적인 독성학의 경우보다 훨씬 더 어렵다고 알려져 있습니다. 예를 들어 입자크기, 거칠기, 모양, 전하, 구성 및 표면 코팅 등이 있습니다. 나노 입자 용량을 추정하기 위해서는 실제 인체 노출 추정치를 기반으로 한 나노입자 독성 테스트가 필요합니다.  첨부 파일에서 nanoparticle에 대한 나노입자 독성학, 세포 수준의 메커니즘, 신체로의 진입 경로 및 공중보건에 대해 가능한 영향 등에 대한 내용이 담겨있으니 참고해주시기 바랍니다.  감사합니다.  

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 특발성 폐 섬유증에 대해서 알아보는 시간을 갖도록 하겠습니다. 특발성 폐섬유증은 원인 모르게 폐포(허파꽈리) 벽에 만성염증 세포들이 침투하면서 폐를 딱딱하게 하는 여러 변화가 발생하여 폐조직의 심한 구조적 변화를 야기하며 점차 폐기능이 저하되어 사망하게 되는 질환입니다. 아직까지는 효과적인 치료방법이 없어 대개 증상이 나타나서 진단을 하게 되면 중앙 생존기간이 3~5년 정도 되는 예후가 매우 나쁜 질병입니다.   Autotaxin(ATX)는 secreted lysophospholipase D인데 이는 세포 밖에서 lysophosphatidic acid(LPA)가 생성되는데 역할을 합니다. 이렇게 생성된 LPA는 세포의 signaling에 관여하는 receptors(LPAR)에 영향을 줍니다. 이 ATX/LPA 축은 결과적으로 Chronic inflammation과 fibroproliferative disorders를 유발하게 됩니다. 소개드린 논문에서는 bleomycin으로 유도된 pulmonary fibrosis 모델에서 ATX의 inhibitor와 LPAR1의 antagonist 투여를 통해 fibrosis 개선 효과를 보여주고 있습니다. 소개드린 논문을 읽어보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 오늘은 토끼 안구의 histological lesions에 대한 문헌을 소개하려합니다. 토끼 안구의 배경병변에 대한 자료는 쉽게 접할 수 없기 때문에, 토끼를 이용한 비설치류 시험에서 안구독성자료를 필요로 하시는 분들께 이번 자료가 유용할 것 같습니다. 본 데이터는 Alcon Research Ltd., a Novartis Division에서 11년간 수행되었던 54개의 연구에서 도출되었으며, 진짜 병변과 구별되는 spontaneous 병변에 대한 풍부한 자료를 포함하고 있습니다. 안구질환관련 치료제를 개발하시거나, 안구 독성에 관심이 있으셨던 분들께 유용한 자료가 되길 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까 CND 관리자입니다. 이번 시간에는 치료용 바이러스를 개발할 때, 치료제가 몸 밖으로 방출되고 배설되는 부분을 어떻게 평가하면 좋을지, 또 어떤 부분을 고려해야 하는지에 대해서 ICH(The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use) 가 제시하고 있는 guideline에 대해 살펴보는 시간을 갖도록 하겠습니다. Shedding은 바이러스/벡터가 환자의 배설물이나 분비물을 통해 퍼지는 것을 의미합니다. 바이러스/벡터의 Shedding은, 투여 부위로부터 환자 체내에서 바이러스가 확산되는 것(Biodistribution)과 혼동되어서는 안 되는데요. Shedding에 대한 평가는 바이러스 전파와 환경에 대한 잠재적 위험성을 이해하는 데에 매우 중요한 평가요소입니다.  물론 이런 규제는 지역마다, 정도가 다르기 때문에, 이 가이드라인은 비임상 및 임상적 Shedding 연구를 디자인 하는 것에 대한 적절한 제안을 하는 것에 의의를 둡니다. 특히, Detection을 위한 분석적 Assay와 비임상 및 임상적 연구 모두에서 스케줄 및 샘플링 프로파일에 대해 고려해볼 사항, 비임상적 데이터를 해석하고 임상적 실험을 디자인하는 법에 대해서도 다루고 있습니다. ICH의 가이드라인을 살펴보시며 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.  

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번 시간에는 coronavirus (SARS CoV-2, SARS-CoV, MERS-CoV)의 동물 모델들에 대해 비교한 논문을 소개하려 합니다. 현재까지 유행한 coronavirus 들은 최근 발생중인 COVID-19를 포함하여, 위의 세 유형의 바이러스들이 유행하였습니다. 이 바이러스의 높은 유병률과 치사율로 인해, 치료제들이 필요해 왔으나 효과적인 치료제나 백신의 개발은 미미한 상태입니다. 이에 코로나 바이러스의 질병 기전을 분석하고자 여러 동물 모델들이 이용되어 왔습니다. 이 논문에선, 비인간영장류를 포함한 여러 가지 동물 모델과, 그 장단점을 소개하고 있습니다. 자세한 내용은 첨부한 논물을 참고 부탁드립니다. 감사합니다.  

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번 시간에 소개할 자료는 Cynomolgus Monkeys의 histological features에 대한 내용으로, non-rodent 시험에서 monkey를 이용하는 경우 오늘 소개드릴 문헌을 참고하면 좋을 것 같습니다. 본 문헌에서는 약물 투여에 의한 병변인 듯 하지만, 사실은 monkey에서 매우 흔하게 나타나는 spontaneous finding인 케이스를 다양하게 소개하고 있기 때문에 monkey 시험을 계획/진행 중이시라면, 매우 유용한 참고자료가 될 것입니다. 감사합니다.

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번 시간에는 TK자리가 deletion되어있는 oncolytic vaccinia virus와 anti-PD-1을 단독, 병용 투여했을 때의 효능에 대해 다루는 논문을 공부해보도록 하겠습니다. 해당 논문은 Vaccines에 개제되어있으며 올해 6월 19일에 pubulish 되었습니다. 해당 논문에서는 CT26 tumor mouse모델을 이용하여, vaccinia virus와 anti-PD-1을 단독 및 병용투여했을 때의 Efficacy를 살펴보았습니다. CT26의 경우 다른 논문에서 PD-1과 TAMs(Tumor Associated Macrophages)의 역할이 CT26에서 잘 밝혀져 있기 때문에 CT26으로 이후 실험을 진행했다고 합니다. 결론적으로 병용요법의 경우 가장 Efficacy가 높았으며, 이는 CD8+PD-1+T cell의 활성화를 높여 항종양효과를 나타냈다고 이야기합니다.(아래 그림파일 참고) 더 자세한 사항은 첨부파일을 참고해주시기 바랍니다. 감사합니다.

안녕하십니까. 비임상개발센터입니다. 이번 시간에는 지난 해 12월 23일에 Elservier Virology 지에 실린 논문을 공부해보고자 합니다. 소개드릴 논문은 "Poxvirus encoded eIF2α homolog, K3 family proteins, is a key determinant of poxvirus host species specificity" 입니다. Protein kinase R(PRK)은 host 안에서 virus가 replication 되는 것을 억제하는 innate immune effector입니다. 이때 virus의 E3와 K3 protein family는 RPK를 억제하는 기능을 하여 바이러스가 더 잘 증식될 수 있도록 합니다. 특별히, K3는 eIF2α homolog 로 RKR에 기질로 붙어서 competitive inhibitor의 역할을 하며, substrate의 인산화를 억제합니다. 이 논문에서는, E3와 K3를 deletion 한 Western Reserve strain vaccinia virus에서 K3 ortholog (동원체, 다른 종에서 비슷한 역할을 하는 유전자)를 삽입하였을 때, 그 바이러스의 증식 기능을 회복되는 것을 보여줌으로써 K3가 바이러스 증식에 있어 종 특이성에 관여한다는 것을 시사하고 있습니다. 첨부드린 자료를 참고하시어, 유익한 시간 보내시길 바라겠습니다. 감사합니다.

안녕하십니까, CND 관리자입니다. 이번 시간에는 간세포암(Hepatocellular carcinoma, HCC)과 비알코올성 지방간염(nonalcoholic steatohepatitis, NASH)에 대한 문헌을 소개해보고자 합니다. HCC는 환자를 사망까지 이르게하는 위험한 암종인데, 이 암종의 발병은 NASH와 상당한 연관성이 있다고 알려져 있습니다. 본 논문에서는, NASH에서 비롯된 HCC의 메커니즘을 밝히기 위해 STAM (Stelic Animal Model) 모델을 연구에 사용하였으며, 질병의 예방과 치료의 예후에 대한 biomarker로써 microRNA를 이용하였습니다. microRNA expression level의 차이가 hepatocarcinogenesis-related pathway를 설명하는데 상당히 유용한 marker로 이용될 수 있다는 점에서 흥미로웠고, 함께 공유하고 싶었습니다. 감사합니다.

안녕하십니까. CND 관리자입니다. 이번주에는 폐동맥 고혈압(Pulmonary Arterial Hypertension, PAH)이 무엇인지, 그리고 폐동맥 고혈압이 유도된 Rat 모델에서 Macitentan 와 sildenafil을 투여하였을 때 나타날 수 있는 효과에 대해서 알아보고자 합니다. 폐동맥 고혈압은 휴식 시 평균 폐동맥 압력이 25mmHg 이상이 되고 폐모세혈관쐐기압력(PCWP)가 15mmHg 이하인 상태를 말합니다. Sham을 투여한 대조군과 Monocrotaline(MCT)로 폐동맥 고혈압을 유도한 동물군에서 saline 투여군, MAC 투여군, MAC+SIL 투여군을 나눠 시험을 진행하였습니다. 이때, echocardiography로 systolic function를 확인하고, 조직학적인 변화를 확인하였을 때, 폐동맥 고혈압이 earlier stage일 때, MAC를 처리한 동물군에서 폐동맥 고혈압이 눈에 뜨게 감소하는 것을 확인하였습니다. 이를 뒷받침하는 serum chemistry result 와 hemodynamic study 결과들도 paper에 기재되어있습니다. 첨부파일을 참고하시어 유익한 시간 보내시길 바랍니다. 감사합니다.